Анализ пцр. ПЦР-диагностика (полимеразная цепная реакция) Сколько по времени делается анализ пцр

Диагностика инфекционных заболеваний разного типа - как вирусных, так и бактериальных - направлена на выявление возбудителей на ранней стадии, что даёт возможность назначить своевременное и особенно эффективное лечение. Самым современным методом обнаружения инфекций является ПЦР, который расшифровывается как полимеразная цепная реакция. В чём суть данного метода и с какой целью он проводится?

Сущность полимеразной реакции

В структуре любого вируса и микроорганизма содержатся молекулы РНК или ДНК. Характерно, что у каждого данные соединения являются уникальными, в связи с чем, выделяя в анализе крови у взрослых или у детей нуклеиновые кислоты, можно поставить диагноз с абсолютной точностью.

К несчастью, концентрация ДНК как в образцах крови, так и в иных биологических материалах, довольно низкая, поэтому посредством обыкновенных диагностических методов её не получается определить. Для того чтобы справиться с данной проблемой, в своё время изобрели цепную полимеразную реакцию.

Итак, сущность данного анализа заключается в специфической обработке кровяного образца, благодаря которой в ней повышается концентрация молекул ДНК, и установление их типа в дальнейшем даёт возможность выявить вид возбудителя, а также поставить верный диагноз.

Как проводится анализ крови на ПЦР

Метод ПЦР осуществляется только в лабораторных условиях. Чтобы его провести, используются особые ферменты, увеличивающие структуру РНК и ДНК пациента в несколько раз. При этом должно сформироваться такое их количество, чтобы стало возможным проведение визуального исследования. В течение обследования осуществляется копирование такого участка, который подходит под требуемые условия по всем параметрам. Что такое анализ крови ПЦР на РНК, интересно многим.

В лаборатории имеется в наличии необходимая база данных, где указывается точная структура разнообразных инфекционных агентов. Использование метода ПЦР позволяет не просто установить вид возбудителя, но и высчитать его количественную пропорцию.

ПЦР-диагностика включает в себя также и некоторые новшества, в числе которых выделяются следующие:

Соединение различных фрагментов ДНК;

Введение мутации;

Установление отцовства и т. п.

Какие заболевания выявляются благодаря ПЦР?

Благодаря ПЦР возможно выявление практически всех бактериальных и вирусных патологий. Для исследования может использоваться не только кровь, но и иные биологические материалы, такие как мазки из уретры и из маточной шейки, слюна, сперма. Анализ становится достаточно информативным тогда, когда возбудитель определённого заболевания попадает в кровь человека. Именно поэтому анализ крови на ПЦР назначается при следующих патологиях:

Вирусные гепатиты типа А, В, С, D и TT;

Инфекция герпетического характера (то есть вирусы первого, второго и четвёртого типов);

Цитомегаловирус;

Энтеровирусная инфекция;

ВИЧ-инфекция;

Краснуха;

Листериоз;

Опоясывающий лишай;

Инфекционный мононуклеоз;

Токсоплазмоз.

Если принять во внимание осуществление ПЦР с помощью иных биоматериалов, то в перечень патологий, которые можно выявить благодаря данному способу, нужно добавить следующие:

Сальмонеллез;

Дифтерия;

Гарднереллез;

Микоплазмоз;

Туберкулез;

Трихомониаз;

- папилломавирусную инфекцию (около ста разнообразных штаммов вируса человеческой папилломы).

Особую актуальность приобрёл в настоящее время ПЦР-анализ крови в период беременности на TORCH-инфекции, к которым относятся токсоплазмоз, цитомегаловирус, герпесвирусная инфекция и краснуха. Это связано с тем, что вышеперечисленные заболевания способны вызвать отклонения в развитии плода.

Плюсы ПЦР

В чём же заключаются преимущества данного метода?

Стопроцентная точность диагностики: при наличии в крови хотя бы нескольких ДНК-фрагментов возбудителя они будут определены реакцией ПЦР, а значит, будет поставлен правильный диагноз. Именно в этом заключается основное отличие подобного метода от иных способов диагностики - общего анализа крови, ИФА и других.
Специфичность. Во время осуществления анализа крови ПЦР на боррелиоз, например,нет такого понятия, как ложноотрицательный или ложноположительный результат, что отличает его от иммуноферментного анализа, или ИФА.
Анализ можно проводить с целью определения сразу нескольких возбудителей на основе одного образца биоматериала, благодаря чему данный метод становится удобным для пациента, ведь ему не придётся сдавать анализ несколько раз.
Быстрота. Нет необходимости в выделении и выращивании возбудителя на особых питательных средах, что необходимо во время бактериологического обследования. Получить готовый результат можно уже непосредственно в день сдачи анализа.

Посредством анализа крови ПЦР на гепатит, к примеру, производится определение скрытого возбудителя заболевания в организме, когда пациент выступает в качестве носителя инфекции (ВИЧ или гепатита).
Доступная цена. Стоимость анализа ПЦР для определения одного возбудителя колеблется в пределах от двухсот пятидесяти до пятисот рублей. Полуколичественное обследование на вирусы стоит немного дороже - около тысячи рублей.

Недостатки метода

ПЦР представляет собой высокотехнологичный исследовательский метод, предъявляющий повышенные требования к лабораторному оснащению. Помещение для проведения анализа должно обязательно иметь фильтр биологической очистки, поскольку в воздухе всё время имеются частицы слюны и кожи, в составе которых содержатся молекулы ДНК. Если не соблюдать технические требования к работе с биоматериалами, то это способно стать причиной неправильного диагноза.

Кто должен сдавать анализ крови на ПЦР?

Пройти исследование может любой человек. Показанием к нему выступает подозрение на передающиеся половым путем инфекции (ВИЧ-инфекция, гарднереллез, хламидиоз). Если случайно произошёл незащищенный половой контакт, исключительно ПЦР позволит поставить верный диагноз ещё на раннем этапе, в случае если человек заразился тем или иным заболеванием.

Кровь на TORCH-комплекс в обязательном порядке сдаётся беременными женщинами, а также теми, кто пока только планирует зачать ребёнка.

Хотя ПЦР - это максимально эффективный способ диагностики, только на нём зацикливаться не нужно. Обследовать пациента при наличии любой патологии необходимо комплексно. Если цепная полимеразная реакция даёт возможность определения возбудителя, то благодаря серологическому исследованию можно оценить уровень эффективности терапии, реакцию организма человека на возбудителя и медикаментозные средства. Анализ крови ПЦР на ВИЧ должен назначаться врачом.

Особенности процедуры и подготовки

Пациенты, которые обследуются с помощью ПЦР-методики, получают самый достоверный результат. Нужно сказать, что при этом вероятность ошибок практически полностью исключается. Довольно быстро готовятся и результаты данного анализа, благодаря чему облегчается определение диагноза и становится возможным своевременное назначение необходимых лечебных процедур.

Достоверность результата, полученного методом ПЦР, обусловливается правильностью сдачи биологического материала на обследование. Он не должен быть чем-либо загрязнен, в противном случае результат не будет объективным.

запрет на половые контакты за сутки до процедуры;
анализ крови для выявления инфекций нужно сдавать утром и только на голодный желудок;
моча также сдаётся в утреннее время в стерильный контейнер.

Через полтора или два дня после проведения процедуры будет произведена расшифровка анализа крови ПЦР и готов результат. Бывают даже такие случаи, когда получить результат можно в тот же день.

Как подготовить материал к анализу?

Для того чтобы максимально успешно провести исследование, необходимо правильно взять у пациента материал и провести грамотную его подготовку. Общеизвестным является тот факт, что в лабораторном исследовании большое количество ошибок (примерно до семидесяти процентов) случается как раз-таки во время пробоподготовки.

В настоящее время в некоторых лабораториях кровь берётся с помощью вакуумных систем. С одной стороны, они в минимальной степени травмируют пациента, с другой - дают возможность взять материал так, чтобы он не контактировал ни с окружающей средой, ни с персоналом. Благодаря этому можно избежать загрязнения биологического материала и максимально обеспечить достоверность анализа.

Расшифровка результатов

Результат анализа крови на ПЦР может быть положительным и отрицательным. Если анализ крови отрицательный, то это свидетельствует об отсутствии инфекционных возбудителей в сданном пациентом материале. Положительный анализ выступает подтверждением того, что в крови имеются инфекционные агенты, а значит, требуется в максимальной степени эффективное и качественное лечение пациента.

Полученный результат может быть положительным даже при отсутствии каких-либо симптомов заболевания. Это свидетельствует или о начале патологического процесса, или о том, что человек является носителем. В случае выявления последнего не требуются какие-либо лечебные процедуры. Пациенту в таком случае рекомендуется постоянно наблюдаться у врача, что подразумевает, например, периодическое исследование анализа крови ПЦР на герпес и другие инфекции.

Чаще всего они обнаруживаются в уретре, в соскобе, произведённом из цервикального канала, в слюне. Однако нужно помнить о том, что больной человек способен заразить совершенно здоровых людей, даже в том случае, если его никак не беспокоит данное заболевание. Оно может приобрести хронический характер. Нужно сказать, что при положительном результате, полученном с помощью ПЦР, необходимо назначение соответствующих лечебных процедур.

Количественная характеристика ПЦР

Анализ крови ПЦР на инфекции характеризуется ещё и количественно. Такой результат может оцениваться исключительно специалистом, поскольку для различных инфекций он индивидуален. Именно количественная характеристика позволяет врачу определить степень активности такого патологического процесса, определить точный этап развития определённого заболевания.

Исследование полученных результатов поможет специалисту выбрать соответствующее лекарственное средство, конкретизировать необходимую дозировку.

Точность диагностики

Выделяется три самых важных характеристики ПЦР, а именно:

Чувствительность;

Специфичность;

Точность.

Диагностика инфекций с помощью ПЦР отличается высокой вероятностью обнаружения в организме инфекционных агентов. Анализ крови и иных жидкостей является высокоспецифичным. Благодаря ему можно с лёгкостью определить конкретный инфекционный процесс, сдав, к примеру, анализ крови ПЦР на гепатит или ВИЧ. Также диагностика ПЦР отличается повышенной чувствительностью. При наличии в исследуемом материале минимального количества инфекционных агентов способ ПЦР всегда будет положительным.

В очень редких случаях может быть получен ложноположительный результат. При отсутствии инфекции он, соответственно, будет отрицательным.

Выявление скрытых заболеваний

При подозрении у человека ИППП назначается анализ крови на определение скрытых инфекций. Любые заболевания половой сферы можно определить только с помощью обследования пациента.

Скрытый характер протекания могут иметь такие заболевания:

уреаплазмоз;
хламидиоз;
микоплазмоз;
герпес;
гонорея;
гарднереллез.

Данные инфекции являются достаточно распространёнными и очень коварными. В начале заболевания они не имеют хорошо выраженных симптомов, поэтому пациенты не обращаются к специалисту. Результаты своевременного анализа крови ПЦР на хламидии, боррелиоз и прочие инфекции помогут врачу назначить эффективное лечение.

ИППП отрицательно воздействуют на репродуктивную систему. Они могут стать причиной бесплодия либо появления у плода пороков. Именно поэтому важно перед планированием беременности сдать анализ ПЦР.

Анализы на ПЦР назначаются во многих случаях. Очевидно, что в современных условиях способна дать самый точный ответ – имеет ли пациент инфекционную составляющую в организме, или нет. Для использования ПЦР методики необходим биологический материал, который и забирается у пациента по назначению лечащего врача.

Как правильно сдавать мазок, анализы на ПЦР? Перед мазком нельзя подмываться, надо сходить в туалет за 3 часа до процедуры. Есть и другие тонкости.

Инфекционные ЗППП, гепатиты, мононуклеоз – все мы стараемся избегать этих заболеваний. Если появились сомнения, например, после незащищенного полового акта, не стоит «прятать голову в песок», лучше сходить к врачу и провериться. Скорее всего, доктор вас попросит сдать анализы на ПЦР.

Если расшифровать аббревиатуру ПЦР, то получится «полимерная цепная реакция». Это самый простой способ обнаружить инфекцию. Для анализов берут различные биологические материалы и проверяют их на наличие чужеродных ДНК, которые принадлежат возбудителям болезни. Благодаря этому анализу можно определить, что за болезнь у пациента, а также узнать количество вредных микроорганизмов, находящихся в организме человека.

Что показывают анализы на ПЦР? Результат анализа ПЦР может быть или отрицательным, т.е. никаких инфекций в организме нет, или положительным. Если он подтверждает наличие инфекции, то врач сможет точно сказать, какая именно инфекция присутствует и в каком количестве.

Какой именно биологический материал берут на анализ? Все зависит от того, какой диагноз хочет опровергнуть или подтвердить специалист. Если нужно диагностировать гепатит или ВИЧ, то берут анализ крови. При подозрении на мононуклеоз – мазок из зева. Чаще всего проверяют наличие половых инфекций, а для этого делается мазок из шейки матки, исследуются выделения из половых органов у женщин, берется мазок из мочеиспускательного канала у мужчин. Или же пациент сдает мочу.

Поговорим более подробно о том, как получить достоверный анализ ПЦР, как сдавать его.

Как сдавать анализы

Как мы уже говорили, врач может попросить сдать для исследования различный биологический материал, поэтому подготовка к процедуре зависит от того, на что именно вы проверяетесь.

Сдача слюны, мочи, спермы

Если специалист берет на анализ слюну, то перед процедурой нельзя есть и принимать лекарства как минимум 4 часа. Перед тем, как сдать анализ, наберите в рот кипяченой воды, чтобы прополоскать его.

Если доктор попросил сдать мочу, то нужно брать только утреннюю. Перед тем, как собрать мочу на анализ, необходимо тщательно подмыться. Чтобы материал был чистым, без посторонних примесей, женщинам во влагалище лучше вставить тампон, а мужчинам постараться оттянуть кожную складку. В контейнере должно быть не менее 50-60 мл мочи.

Если берут на анализ сперму у мужчин, то перед ее сдачей он должен воздерживаться от половых контактов как минимум 3 дня. Также в это время не стоит посещать сауну, принимать горячую ванну, употреблять спиртные напитки, есть острую пищу. Важно перед тем, как сдать анализ, как минимум 3 часа не ходить в туалет, т.е. воздержаться от мочеиспускания.

Если врач попросил сдать кровь, то это делается утром, натощак. Перед этим не стоит увлекаться жирной пищей и пить алкогольные напитки.

Содержание

Тем, кто интересуется новыми способами диагностики, следует узнать, что такое метод ПЦР. Современные технические возможности в области лабораторных исследований предоставляют возможность выявлять множество заболеваний на начальных стадиях. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) считается на данный момент самым точным и новым методом.

Анализ методом ПЦР

ПЦР анализ - что это такое? Это метод использует принципы молекулярной биологии. Для исследования материала применяются особые ферменты, которые многократно и быстро копируют ДНК, РНК фрагменты возбудителей болезни. Существует разные виды ПЦР анализа в зависимости от исследуемого материала (кровь, моча, кал и т.д.). После обработки сотрудники лаборатории сравнивают с базой данных полученный результат, выявляют концентрацию, тип возбудителя.

Анализ на ПЦР помещают в специальный амплификатор (прибор), который нагревает и охлаждает пробирки с биоматериалом. Изменения температуры нужны для репликации фрагментов. Точность результата будет зависеть от точности температурного режима. Метод полимеразной цепной реакции помогает выявить:

инфекционный мононуклеоз;
цитомегаловирусную инфекцию;
вирусные гепатиты G, C, B, A;
инфекции/заболевания, передающиеся половым путем (ИППП/ЗППП): гарднереллез, трихомониаз, уреаплазмоз;
герпетическую инфекцию;
онкогенные вирусы;
листериоз;
хеликобактерную инфекцию;
клещевой энцефалит, боррелиоз;
туберкулез;
кандидоз.

Крови

На данный момент из-за новизны технологии анализ крови методом ПЦР все еще имеет высокую цену. Для подготовки биоматериала не нужно соблюдать определенные требования. Даже вызванные физическими нагрузками, стрессами, сменой рациона питания изменения состава не влияют на результат исследования. ПЦР анализ крови может испортить только прием антибактериальных средств, поэтому перед сдачей необходимо выдержать паузу между лечением и тестом.

ПЦР исследование крови – самый распространенный вариант диагностики хронических, острых инфекционных патологий при вирусном или атипичном проявлении. Серологические методы исследования имеют определенную трудность при проведении – определение наличия возбудителя проводится по наличию антител в организме человека. Результат мог быть ложноотрицательным, если состояние больного не давало время для их выработки.

Мазка

В сфере гинекологии для исследования наличия инфекционных микроорганизмов используют ПЦР анализ мазка. Работа с материалом проводится по тому же принципу, что и с кровью: многократное увеличение фрагментов ДНК возбудителя, чтобы с легкостью его идентифицировать. Это же помогает обнаружить скрытые инфекции у женщины. Для проведения анализа могут быть взяты разные биологические жидкости: слюна, мокрота, моча, кровь. В гинекологии для точности определения чаще используется мазок со слизистой влагалища из цервикального канала.

Для проведения ПЦР существуют определенные показания. Нередко его нужно сделать, чтобы выявить устойчивый к антибиотикам вид возбудителя. У женщин основными показаниями для диагностики по этому методу выступают:

беременность, которая протекает тяжело;
острая фаза ИППП;
если есть подозрение на переход ИППП в хроническую стадию;
поиск причин бесплодия.

Кала

Для выявления инфекции может быть назначен со стороны врача анализ кала на ПЦР. Для того, чтобы получить максимально достоверные результаты после теста, необходимо придерживаться следующих правил перед забором биоматериала:

за несколько суток прекратить прием слабительных препаратов: масла, свечи;
исключить медикаменты, которые дают специфическую окраску калу, к примеру, с содержанием железа.

Для забора следует использовать стерильную палочку и контейнер. Чем-либо их дополнительно протирать, ополаскивать не нужно. При сборе материала будьте осторожны, вы не должны задеть рукой внутренние стенки контейнера. Следите, чтобы в кале не было примесей мочи, нельзя использовать дополнительные вспомогательные средства для испражнения (клизма). Собирать материал нужно в день сдачи, хватит 1/3 объема контейнера. Данный метод диагностики имеет следующие преимущества:

Мочи

При необходимости для проведения теста врач может взять для исследования мочу. Высокая точность открывает возможность работать с любой биологической жидкостью, из которой удается извлечь ДНК вируса. Чтобы сдать анализ мочи ПЦР, нужно придерживаться таких ограничений перед забором материала:

минимум за 1 день до процедуры прекратить половые контакты;
за 3 недели до сдачи должно быть окончено любое антибактериальное лечение, потому что медикаменты смажут картину;
сдавать анализ нужно натощак (жидкость тоже запрещена);
брать нужно первую утреннюю порцию материала.

Результаты анализов ПЦР

Из вышенаписанного понятно, что такое ПЦР анализ и видны явные преимущества такого метода исследования. Еще один плюс данной диагностической процедуры – простота расшифровки результатов. Учитывая, сколько делается анализ ПЦР (сам процесс занимает около 5 часов, но лаборатория выдает данные через 1-2 суток), данный метод диагностики становится лучшим вариантом для определения множества инфекций. По результатам врач может сказать вам, что тест:

Отрицательный – в исследуемом материале не было искомого возбудителя.
Положительный – были найдены РНК, ДНК возбудителя.

Иногда проводится количественное определение микроорганизмов. Это необходимо при заболеваниях, которые вызывают условно-патогенные возбудители. Особенность этих вирусов в том, что проявляются они только при избыточном количестве и найти их обычными исследованиями крайне проблематично. Этот фактор важен для выбора терапевтической тактики, чтобы эффективно лечить вирусные инфекции, к примеру, гепатит, ВИЧ.

На 12 инфекций

Чтобы понять до конца, что такое ПЦР диагностика инфекций и насколько она эффективна, нужно узнать, что она способна выделять до 12 возбудителей. Проводится текст только в лабораторных условиях. Для исследования применяют специальные ферменты, которые увеличивают во много раз количество РНК, ДНК фрагментов вируса. Анализ ПЦР на 12 инфекций способен выявить:

микобактерии туберкулеза;
цитомегаловирус;
гепатит C, G, B, A;
герпес 1, 2 типа;
вирус Эпштейн-Барра (инфекционный мононуклеоз);
инфекции, которые передаются половы путем, к примеру, хламидии;
листериоз;
кандидозную инфекцию;
хеликобактер пилори;
боррелиоз, клещевой энцефалит.

На гепатит С

Этот диагностический метод помогает определить наличие вируса в крови. Это дает врачам возможность говорить о его наличии или отсутствии. Анализ ПЦР на гепатит С бывает двух видов: качественный и количественный. Первый вариант указывает только на его наличие и может иметь формулировку «обнаружен»/«не обнаружен». Этот вид теста имеет чувствительно в 10-500 МЕ/мл. Это говорит о том, что при низком содержании возбудителя в организме анализ будет «не обнаружено».

Количественный анализ более точный и покажет концентрацию инфекции в крови. Обозначается этот показатель как «вирусная нагрузка», измеряется в количестве вирусной РНК на конкретный объем крови. Расшифровка в разных лабораториях может отличаться. Помимо измерения в МЕ/мл используются единицы измерения «копии». Пересчитать копии на МЕ можно по формуле: 1 МЕ = 4 копии. Если в расшифровке значение присутствие вируса превышает 800 000 МЕ/мл (или 800*103), это говорит о высоком содержании возбудителя.

На туберкулез

Делать тест следует в утреннее время. Это важно для того, чтобы не дать всему массиву мокроты, который образовался за ночь, выйти из желудка. Анализ ПЦР на туберкулез так же важен как ИФА, Манту, томографе. Тест помогает выделить наличие микобактерий, состояние мочи, общий иммуноглобулин, СОЭ, определить состояние легких на данный момент. Для точности получения результатов при анализе ПЦР необходимо проводить его с соблюдением следующих правил:

Осуществляется посев 3 раза, но полную аспирацию содержимого желудка следует проводить только в условиях стационара.
Выявляет микобактерии посев наличествующих масс в желудке менее чем в 50% диагнозов. Даже при получении оптимальных условий рекомендуется вместо них УЗИ.
Даже при отрицательном характере результата не может быть полностью исключена вероятность развития туберкулеза с изменением СОЭ, иммуноглобулина или других показателей.
Посев материалов при ПЦР менее восприимчив на патологические состояния, если получен он в рамках бронхоскопического обследования, который исключает подозрения на ТБ у ребенка.

На ВИЧ

Для многих людей данный диагноз считается смертельным приговором. По этой причине после частых половых связей человек становится более внимателен к сигналам, которые подает его тело (а иногда придумывает их). Самый надежный вариант получить подтверждение или опровержение данного заболевания – ПЦР анализ на ВИЧ. Тест можно использовать для определения следующих возможных проблем со здоровьем:

Опровержение/подтверждение наличия ВИЧ в период серонегативного кона.
Определение генотипа ВИЧ-1, ВИЧ-2.
Уточнение описания патологического процесса при сомнительном результате иммуноблота.
Заражение после переливания крови.
Определения ВИЧ-статуса у детей, которые родились от матерей-носителей заболевания.
Помогает установить наблюдение за вирусной загруженностью организма.

На ВПЧ

Вирус папилломы может быть выявлен у любого человека, долгое время он может находиться в латентном состоянии. Развитие провоцирует ослабление иммунитет, стрессы или эмоциональные всплески. Анализ ПЦР на ВПЧ помогает определить концентрацию вируса в крови. По этой причине рекомендуется проводить количественно определение, а не качественное. Эти данные помогут спрогнозировать вероятность развития злокачественного характера инфекции.

Методика диагностики наличия ВПЧ основывается на основном свойстве ПЦР выделять из материала ДНК вируса. Из-за высокой чувствительности теста даже небольшое количество бактерий будет обнаружено. Количественное исследование открывает врачам возможность установить степень опасности заболевания, составить прогноз на будущее. Эта диагностика обязательна для всех мужчин и женщин, которые обнаружили у себя кондиломы. Количественный анализ ПЦР поможет определить, что послужило причиной развития ВПЧ: временное снижение иммунитета или хроническое заболевание.

На герпес

Данный вид диагностики в микробиологии помогает с высокой точностью проводить анализ ПЦР на герпес. Копирование фрагментов ДНК вируса будет происходить только, если в материале присутствует нужный ген. В данном случае тест по результатам проведения может указать на наличие или отсутствие возбудителя. Выявить его удастся даже при низкой концентрации в крови.

Еще один плюс анализа ПЦР в том, что он может определить герпетическую вирусную инфекцию сразу же после заражения, до появления клинической симптоматики. Можно определить тип герпеса (1 или 2), для сдачи анализа специфической подготовки не требуется, но врачи рекомендуют перед забором крови отказаться от:

жареного;
острого;
алкоголя;
жирного.

При беременности

При вынашивании ребенка очень важно провести данное исследования, чтобы поставить на учет состояние женщины. ПЦР анализ при беременности входит в перечень самых эффективных методов определения наличия разнообразных заболеваний. Провести тест нужно не только для выявления патологий, но и для определения вероятности заражения ребенка внутриутробно. Только благодаря ПЦР-диагностики стало возможным выявить степень прогрессирования, развитие множества инфекций внутри утробы матери.

Сдача анализов ПЦР

Если вам интересно, как берут анализ ПЦР, то следует рассматривать каждый отдельный случай, учитывая тип биоматериала. Соскоб, мазок или забор крови имеет свои особенности, к примеру.

В большинстве случаев пациентам приходится сталкиваться с такой ситуацией, когда для обследования или определения заболевания требуется ПЦР диагностика. Важно понимать, что она собой представляет и для чего необходима.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) – это такое исследование, которое помогает определить многие заболевания на начальных этапах развития. Суть его заключается в нахождении ДНК или РНК присутствующего в организме патогена. ПЦР позволяет определить возбудитель в тех случаях, когда другие виды исследования неэффективны.

Популярность данного метода состоит в простоте и широте использования. Он применяется клиницистами для диагностики различных заболеваний. Позволяет быстро проводить сложные количественные и геномные исследования.

Одним из наиболее важных медицинских применений классического метода ПЦР является обнаружение микроорганизмов, которые способны вызывать патологические состояния.

Суть анализа ПЦР

ПЦР диагностика (что это такое, объясняется молекулярной биологией) является методом молекулярного клонирования, используемого для анализа короткой последовательности ДНК, которая присутствует в минимальных количествах в образцах, содержащих какой-либо генетический материал. Этот метод часто называют «копировальным аппаратом ДНК».

ПЦР диагностика осуществляется in vitro (вне тела) в лаборатории и основана на естественном процессе удвоения ДНК перед её делением. Кроме возможности обнаружить вирус, бактерию или другие микроорганизмы в образце, ПЦР позволяет идентифицировать их количество.

При таких заболеваниях, как заражение вирусом гепатита С или вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусная нагрузка является хорошим показателем того, на каком этапе находится заболевание и насколько эффективной является терапия.

Вооруженные этой информацией, врачи могут определить, когда следует начинать лечение, а также контролировать сам процесс. Это позволяет составить индивидуальный подход для каждого пациента.

ПЦР диагностика включает три этапа, в каждом из которых количество ДНК-мишени увеличивается в разы. В результате такой реакции получается более одного миллиарда копий исходной или «целевой» ДНК, что и позволяет оценить присутствие вируса в организме. Это и является основным свойством метода ПЦР.

Преимущества и недостатки метода

ПЦР диагностика (что это такое, рассказано выше) была подробно описана Кери Муллисом в 1983 году. С тех пор метод пользуется огромной популярностью в лабораторной практике.

Основными преимуществами такого вида исследования является:

универсальность;
быстрота результатов;
высокая вероятность получения достоверных результатов;
специфичность;
многообразие заболеваний, которые можно определить.

Универсальность метода ПЦР состоит в возможности использования любых физиологических материалов человека. Даже одного волоса достаточно для анализа.

Процесс обработки данных, благодаря автоматизации, может занять несколько часов. Специфичность состоит в выделении определённого ДНК-фрагмента, характерного для конкретного возбудителя. С помощью ПЦР-анализа могут быть диагностированы многие заболевания, как в стадии обострения, так и в стадии скрытого течения.

Но, несмотря на огромное количество достоинств, метод диагностики ПЦР имеет и недостатки:

вероятность ложноположительных результатов;
высокая чувствительность;
изменчивость микроорганизмов.

Основной недостаток метода состоит в неспособности ПЦР отличить живые микроорганизмы от погибших . Как правило, это относится к ситуации, когда следует оценить успешность проводимого лечения. В этом случае, если болезнь пролечили, то мёртвые клетки ещё некоторое время находятся в организме человека и для полного его обновления необходимо некоторое время от 4 до 6 недель.

Высокая чувствительность является преимуществом и в то же время недостатком. Некоторые микроорганизмы в малом количестве присутствуют в организме. Поэтому в этом случае этот метод диагностики не является информативным, и рекомендуется применять другие типы исследования.

Любые микроорганизмы способны мутировать. И даже несмотря на то, что в процессе амплификации используется специфичный фрагмент, который наименее подвержен изменениям, он все равно может приобретать мутации и становиться невидимым для тест-системы. Такая ситуация объясняет тот факт, что различные системы лабораторных анализов могут показывать абсолютно разные результаты.

В каких сферах используется метод

Исследование ПЦР может применяться в клинической практике для идентификации различных заболеваний. Широко используется в гинекологии, урологии, гастроэнтерологии, онкологии и др. Кроме того, он эффективно применяется в криминалистике для установления личности и при установлении отцовства.

Данный тип исследования используется на этапе планирования и во время беременности. Анализ на TORCH-инфекции проводится для того, чтобы выявить присутствие инфекции в организме женщины. Заболевания, вызванные одной из инфекций, могут протекать в легкой форме для женщины, но вызывать серьёзные врождённые дефекты плода, вплоть до его гибели.

Также метод ПЦР диагностики помогает определить генетическую предрасположенность человека к развитию определённых заболеваний в будущем.

Какие инфекции выявляет диагностика методом ПЦР

Метод ПЦР помогает выявить вирусы, бактерии и грибки.

Наиболее распространённые болезни, которые можно диагностировать с его помощью:

Какие биологические материалы исследуются

Учитывая заболевание, симптомы и цели исследования ПЦР-диагностика может использовать любую жидкость физиологического характера или частичку ткани.

Это может быть:

кровь;
слюна;
мокрота;
моча;
испражнения;
мазок из ротоглотки;
кусочек поражённой ткани;
синовиальная жидкость;
соскоб из влагалища у женщин или из уретры у мужчин;
эякулят;
волосы и другие.

При заболеваниях мочеполовой системы берётся моча, мазок из влагалища у женщин или из уретры у мужчин. Венозная кровь сдаётся для диагностики таких заболеваний, как ВИЧ, гепатиты различных типов, TORCH-инфекции.

Для того, чтобы исключить или подтвердить онкологию, во время хирургических вмешательств изымаются кусочки ткани на биопсию.

Как подготовиться к анализу

Особенности подготовки к исследованию зависят от биоматериала, который сдаётся. Также следует помнить о том, что необходимо исключить приём антибиотиков и других медикаментозных средств. Для контроля эффективности лечения следует выдержать интервал после приёма препаратов не менее 4 недель.

Кровь сдаётся с утра натощак. Моча и кал должны быть помещены в предназначенный для этого, абсолютно стерильный контейнер. При этом, перед сбором мочи необходимо провести гигиену внешних половых органов.

Если сдаётся мазок, необходимо:

не мочиться в течение 3-х часов;
не рекомендуется подмываться и спринцеваться накануне (для женщин);
за сутки прекратить половую жизнь;
женщинам мазок следует сдавать в середине цикла.

Этапы ПЦР-исследования

Перед началом ПЦР, ДНК должна быть выделена из образца. Выделение ДНК представляет собой многоступенчатый процесс, который может быть выполнен вручную или инструментально.

После подготовки образца начинается трехступенчатый процесс ПЦР:

разделение целевой ДНК (денатурация);
амплификация (размножение) ДНК-фрагментов;
детекция (выявление) амплифицированных фрагментов ДНК.

Первый этап ПЦР имеет название денатурация. Суть его состоит в том, что пробирку с ДНК образцами нагревают до высоких температур (приблизительно 90 градусов). Из-за высоких температур разрушаются слабые связи между нуклеотидами, образующими код молекул. В результате этого происходит разделение двухцепочечной ДНК или РНК на две отдельные нити.

Для «чистоты» исследования в исследуемый биоматериал добавляется специальный раствор, который растворяет органические вещества. Продолжительность данного этапа зависит от вида исследуемого материала и возбудителя инфекции.

ПЦР диагностика (что это такое, описано выше) на втором этапе осуществляет размножение ДНК-фрагментов на основе самой ДНК инфекции. ПЦР не копирует всю нуклеиновую кислоту в образце. Он копирует только особую последовательность генетического кода, короткий фрагмент (праймер).

На втором этапе пробирка охлаждается. Весь процесс ПЦР автоматизируется с помощью машины, называемой термостатом или амплификатором, и может быть завершен в течение нескольких часов. Машина ПЦР запрограммирована на изменение температуры реакционной смеси каждые несколько минут. Это происходит для того, чтобы короткие фрагменты смогли связаться с одноцепочечной матрицей.

Амплификация происходит в 30-40 циклов. В этот период врач-лаборант копирует ДНК-фрагмент и увеличивает его количество методом цепной реакции. Таким образом, с каждым циклом, количество копий возрастает до нескольких миллионов или даже миллиардов.

В третьей фазе исследования происходит выявление присутствия ДНК вирусов и бактерий. Это осуществляется путём распределения полученной смеси и добавления в неё специального раствора. Эта жидкость позволяет фрагментам ДНК приобретать определённую окраску под действием ультрафиолетовых лучей. Это и является индикатором того, что патогенные микробы присутствуют в организме человека.

ПЦР во время беременности

ПЦР диагностика (что это такое, описано выше) впервые может назначаться при беременности, так как является обязательной процедурой. Этот метод помогает выявить скрытые инфекции и угрозу развития пороков у плода.

Для проведения анализа используют:

Существуют заболевания инфекционного характера, которые могут негативно влиять на развитие плода, вызывая пороки, стать причиной преждевременных родов и выкидышей. Они особенно опасны в первом триместре беременности и, в большинстве случаев, являются медицинским показанием для прерывания беременности. Эти инфекции имеют общее название TORCH-комплекса.

Анализ ПЦР помогает установить наличие или отсутствие инфекции в организме беременной женщины. Зачастую проводится на этапе планирования беременности или в первом триместре. В случае положительного результата, требуется повторное проведение исследования. И только после подтверждения результатов, назначается соответствующее лечение.

ПЦР для диагностики ВИЧ

Метод ПЦР для диагностики ВИЧ-инфекции является дорогостоящим анализом и используется по особым показаниям. К ним относится донорство, а также он может быть назначен пациентам, пострадавшим в автомобильной аварии с людьми, носителями ВИЧ.

ПЦР помогает установить наличие инфекции на ранних сроках до того, как организм выработает антитела к ВИЧ. Результат с высоким процентом вероятности исследование может показать уже через 5-14 дней после проникновения вируса.

В других случаях наличие вируса в организме человека помогает установить имунноферментный анализ (ИФА). Он определяет антитела к ВИЧ в крови человека, которые начинают вырабатываться через 1-3 месяца после заражения. Количественное определение анализ микроорганизмов необходимо для контроля лечения пациентов.

ПЦР для диагностики гепатитов

Вирусный гепатит С является тяжёлым заболеванием, которое может привести к развитию цирроза печени. В инкубационный период, который может составлять до 12 месяцев, вирус никак себя не проявляет, пациент практически не заразен, и вирус невозможно определить по обычному анализу крови.

Чаще всего, при несвоевременном лечении, заболевание переходит в хроническую форму и грозит множественными осложнениями.

При заражении гепатитом В, инкубационный период не так продолжителен и первые симптомы могут наблюдаться уже через 4 недели. Именно в этот период ИФА может показать присутствие вируса в организме.

Метод ПЦР позволяет:

выявить болезнь на этапе инкубационного развития;
разрешить сомнительные анализы других исследований;
оценить эффективность противовирусной терапии.

Отсутствие ДНК-вируса гепатита после проведённого лечения – признак его эффективности.

Анализ на туберкулез

Развитие туберкулёза провоцирует палочка Коха, которая может попасть в организм человека воздушно-капельным путём. Заболевание имеет две формы: скрытую и открытую. В первом случае инфицированный человек не является носителем инфекции и микобактерии в мокроте не выявляются даже при помощи ПЦР. Опасность эта форма всё же имеет, так как способна переходить в открытую стадию.

Открытая (активная) стадия представляет опасность для окружающих даже в случае строгого соблюдения правил личной гигиены. Для диагностики заболевания используют флюорографию, томографию и рентген грудной клетки. Также с этой целью применяют кожную туберкулированную пробу (пробу Манту). Но наиболее эффективным методом исследования является ПЦР.

В качестве исследуемых образцов используют:

кровь;
мокроту;
жидкость бронхов.

ПЦР для диагностики ВПЧ

Диагностика на ВПЧ проводится в случае наличия симптомов заболевания таких как, папилломы и бородавки в области половых органов. Также исследование назначается на этапе планирования беременности, в случае бесплодия, выкидышей, а также в ситуации заражения одного из партнёров, так как один из механизмов передачи вируса – половой.

Наиболее опасным является не само присутствия вируса в организме, а его тип. Некоторые его виды (16 и 18) являются высокоонкогенными и могут вызывать рак шейки матки у женщин. Метод ПЦР может назначаться совместно с другими видами исследования. Для анализа чаще всего используют мазок из половых органов. Кровь, моча и выделения из влагалища в качестве биоматериала используются крайне редко.

При герпесе

Этот тест диагностирует генитальную инфекцию вирусом простого герпеса 1 и 2 типа (HSV1 / HSV2). При положительном результате HSV2, следует пройти тест на ВИЧ и другие ЗППП. Для анализа требуется венозная кровь пациента.
Также может исследоваться моча, выделения и содержимое высыпаний при наличии симптомов.

Комплексное обследование ПЦР

В случае наличия показаний или же с целью профилактики заболеваний может быть назначен комплекс анализов методом ПЦР. Чаще всего инициатором выступает сам пациент, бывают случаи, когда комплексное обследование назначается для предотвращения вспышек определённых заболеваний в конкретном регионе.

ПЦР-12 – это комплексное исследование, которое охватывает следующие инфекции:

Гепатит.
Герпес.
ЗППП.
Туберкулёз.
Энцефалит.
Кандидоз.
Хеликобактерная инфекция.
Цитомегаловирус.
Мононуклеоз.
Онковирусы.
Листериоз.

Расшифровка анализа ПЦР

После проведения анализа методом ПЦР может быть озвучен положительный или отрицательный результат.

Результаты ПЦР диагностики выглядят вот так. Что это такое и как расшифровать расскажет врач

Точность ПЦР-диагностики

В большинстве случаев ПЦР диагностика предоставляет высокоточные результаты. Но в некоторых случаях для подтверждения правильности диагноза требуются дополнительные методы исследования.

Из-за чего может получиться ложный результат?

Ложноположительные результаты могут получиться в результате несоблюдения правил сбора анализа и проведения самой процедуры исследования.

Сам пациент может быть виновником ложной информативности в случае ненадлежащей подготовки к сдаче биоматериала. Оснащённость лаборатории и профессионализм врача непосредственно могут влиять на результаты исследования.

Где пройти ПЦР-диагностику

ПЦР диагностика производится в частных клиниках и лабораториях по назначениям врача или по инициативе самого пациента с целью профилактики.
Предпочтение следует отдавать клиникам и лабораториям с современным оборудованием, которые существуют не первый год на медицинском рынке и зарекомендовали себя.

ПЦР анализ: стоимость и сроки

Этот метод диагностики отличается высокой стоимостью. Его цена колеблется от 200 до 500 рублей за каждый вид. Комплексное обследование на наличие нескольких инфекций позволяет значительно сэкономить, по сравнению с оплатой каждого отдельного исследования.

Срок проведения исследования зависит от типа инфекции и может занять от 1 до 5 дней. Также эти показатели зависят от оснащённости лаборатории и квалификации медицинского работника.

ПЦР диагностика (о том, что это такое, подробно описано в данной статье) является наиболее точным и быстрым методом исследования. Она является одним из важнейших открытий в ХХ ст. в области медицины.

Благодаря этому методу стало возможным полное излечение от многих болезней. Но не стоит забывать о том, что ПЦР имеет и некоторые недостатки, и его эффективность иногда повышается совместно с использованием других методов исследования.

Оформление статьи: Владимир Великий

Видео про ПЦР диагностику

Про точность ПЦР:

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – достижение молекулярной биологии, одна из главных методик клинической лабораторной диагностики конца 20-го и начала 21-го веков, приносящая огромную пользу в различных областях медицинской науки.

Таким образом, даже если среди миллионов клеток человеческого организма затеряется не сам живой вирус, а лишь частица его ДНК, то ПЦР, если ей ничто не помешает, пожалуй, справится с задачей и сообщит о пребывании «чужака» положительным результатом. В этом суть ПЦР и ее основное достоинство.

Достоинства и недостатки

К лаборатории, осуществляющей ПЦР-диагностику, предъявляются высочайшие требования в плане оборудования, тест-систем и квалификации медицинского персонала. Это высокотехнологичная лаборатория, располагающая арсеналом высокочувствительных и высокоспецифичных реагентов, поэтому особых недостатков она не имеет. Разве что выдает положительный результат при отсутствии клинических проявлений и тем самым ставит лечебника перед дилеммой: стоит начинать лечение или нет?

Врач, наблюдающий пациента, начинает сомневаться в достоверности результатов тестирования, поскольку никаких признаков заболевания не видит. Но все же, учитывая высокую чувствительность ПЦР-системы, следует помнить, что она обнаруживает возбудителя даже в доклинической стадии , а положительный результат в таком случае является скорее достоинством, чем недостатком. Исходя из этого, лечащий врач должен сам принять решение о целесообразности терапии, взяв во внимание и другие аргументы «за» и «против».

Преимущества диагностики с помощью полимеразной цепной реакции очевидны:

Высокая специфичность , достигающая 100%, обусловленная присутствием в отобранном образце частиц нуклеиновых кислот, присущих конкретному организму, но чужеродных человеку;
Высокая производительность , ведь ПЦР – высокотехнологичная автоматизированная методика, предоставляющая возможность проведения тестирования в день забора материала и избавления, таким образом, пациента от лишних треволнений;
ПЦР, работая над одной пробой, способна провести несколько исследований и обнаружить несколько возбудителей , если ей будет такое задание. Например, при диагностике хламидийной инфекции, где ПЦР относится к основным методам, наряду с хламидией, можно обнаружить и нейссерию (гонококк) – возбудитель . Причем, на достоверности результатов это негативно не отражается;
Тестирование методом ПЦР выявляет опасные микроорганизмы в инкубационном периоде , когда они еще не успели нанести ощутимый вред организму, то есть, ранняя диагностика предупреждает о грядущем развитии патологического процесса, что дает возможность подготовиться к нему и принять во всеоружии.

Кроме этого, во избежание недоразумений, иной раз возникающих при диагностике, ПЦР защищает себя еще и тем, что ее результаты могут зафиксироваться (фотография, компьютер) с целью использования их в экспертных целях, если будет на то необходимость.

Нормой в ответах ПЦР считают отрицательный результат , указывающий на отсутствие фрагментов чужеродных нуклеиновых кислот, положительный ответ будет свидетельствовать о наличии инфекции в организме, цифровые значения означают состояние вируса и его концентрацию на момент тестирования. Однако полную расшифровку анализа осуществляет врач, прошедший специальную учебу по теме «ПЦР». Пытаться же интерпретировать результаты самостоятельно не имеет никакого смысла, поскольку можно, что скорее всего и произойдет, неправильно понять и начать заранее волноваться.

Чего «боится» ПЦР, что она умеет и как к ней подготовиться?

Как в любых других исследованиях, иной раз результаты теста оказываются ложноположительными или ложноотрицательными , где ПЦР исключением не является. Подобное может происходить в случаях:

Нарушения технологического процесса на одном из этапов реакции;
Несоблюдения правил забора материала, его хранения или транспортировки;
Присутствие посторонних примесей в материале.

Это говорит о том, что к ПЦР – диагностике инфекций нужно подходить внимательно, осторожно и аккуратно, иначе образцы материала могут поменять свое структурное строение или вовсе разрушиться.

Этапы ПЦР-диагностики. Ложные результаты могут дать нарушения на любом из этапов исследования

ПЦР-диагностика инфекций относится к категории «золотых стандартов» среди других лабораторных методов, поэтому ее можно применить для поиска возбудителей многих заболеваний, на первый взгляд не имеющих ничего общего между собой:

Туберкулез различной локализации, пневмония (в том числе и атипичная, вызванная хламидией);
Детские инфекции (коревая краснуха, паротит, корь);
Дифтерия;
Сальмонеллез;
Зоонозная инфекционная болезнь – листериоз (заболевание характеризуется многообразием симптомов с поражением лимфоузлов, ЦНС, внутренних органов);
Заболевания, обусловленные проникновением вируса Эпштейн-Барра (инфекционный мононуклеоз и др.);
Онкологическая патология, спровоцированная папилломовирусной инфекцией (ВПЧ и его типы);
Боррелиоз (болезнь Лайма, клещевой энцефалит);
Хеликобактерная инфекция, возбудителем которой является проживающий в желудке человека микроб Helicobacter pylori. Доказано, что хеликобактер становится причиной развития рака желудка или 12-перстной кишки;
и практически все .

ПЦР-диагностика инфекций, передающихся половым путем, имеет особую значимость, поскольку заболевания, вызванные таким образом, часто длительное время протекают без каких бы то ни было клинических проявлений, зато при беременности начинают активизироваться и, таким образом, угрожать здоровью и даже жизни ребенка. Аналогично себя ведут и . Некоторые из них («торч») относятся одновременно и к ИППП, поэтому последние требуют более подробного рассмотрения. Ознакомиться с самыми популярными методиками читатель сможет в следующих разделах статьи.

Как правильно подготовиться, чтобы получить достоверный результат?

Сразу заметим, что подготовка к ПЦР довольно простая, никаких особых усилий со стороны пациента не требующая. Нужно лишь выполнить три несложных задания:

Не иметь половых контактов за 24 часа до того, как сдать анализ;
Для забора и анализа крови из вены нужно прийти на голодный желудок, пить, кстати, тоже нельзя;
Сдать мочу следует ночную (утром – в стерильную баночку, приобретенную накануне в аптеке).

ПЦР может работать в любой биологической среде

Метод ПЦР не отличается «кровожадностью», поэтому приемлет любую биологическую среду, содержащую предполагаемый инфекционный агент.Обычно выбор – что нужно взять для исследования, остается за врачом.

Таким образом, в поисках возбудителя, кроме анализа крови (хотя он тоже подходит и в большинстве случаях берется параллельно другому материалу), можно использовать:

(выделения урогенитального тракта);
Соскоб слизистых ротовой полости, конъюнктивы, носоглотки, половых путей (у женщин берут из шейки матки и влагалища, у мужчин – из уретры);
Слюну;
Сперму;
Сок предстательной железы;
Ткани плаценты и амниотиотическую жидкость (околоплодные воды);
Осадок мочи (после центрифугирования), например, для выявления некоторых ИППП и микобактерий туберкулеза;
Мокроту и плевральную жидкость с той же целью;
Экссудаты;
Спинномозговую жидкость при подозрении на инфекционное поражение ЦНС;
Биопсийный материал (биоптат), взятый из печени, 12-перстной кишки, желудка и пр.

К вышеперечисленному хочется добавить, что материала для тестирования во всех случаях, даже в соскобах и выделениях, будет достаточно, так как тестирование методом ПЦР больших объемов не требует, анализу хватает и нескольких микролитров, которые обычно берут в микропробирку типа «эппендорф» и отправляют на исследование.

Болезни и применение ПЦР

ВИЧ и полимеразная цепная реакция

Обычно при прохождении анонимного обследования в случае положительных результатов иммуноблотинга, диагностику повторяют заново. Если диагноз подтверждается, пациенту назначают дополнительные исследования:

Определение с помощью иммунологических реакций абсолютных значений количества лимфоцитов CD 4 (иммунокомпетентные клетки – Т-хелперы или помощники), которые инфекция поражает в первую очередь, после чего они теряют свои основные свойства и не могут отличить «свое» и чужое». Циркулирующую в плазме крови РНК вируса они принимают за нормальные клетки организма и не реагируют на них;
Обнаружение РНК вируса методом ПЦР и расчет концентрации вирусных частиц с целью установления стадии, тяжести патологического процесса и прогноза с учетом этих данных . Разумеется, слово «норма» в этом плане не существует, поскольку реакция всегда положительна, а расшифровка цифровых значений находится в компетенции врача.

ПЦР и гепатиты

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей , чаще всего тест используется для диагностики С гепатита, который плохо определяется другими методами.

Вирус гепатита С (РНК-содержащий) по своему поведению в организме человека напоминает ВИЧ. Вклиниваясь в геном клеток печени (гепатоцитов), он пребывает там в ожидании своего часа, который может наступить хоть через 2 года, хоть через 20 лет, поэтому медики прозвали его «ласковым убийцей». Гепатит С приводит к формированию злокачественного процесса в печеночной паренхиме, который проявляется на поздних стадиях. Все эти события иммунная система не замечает, принимая вирус за гепатоцит. Правда, антитела к вирусу в некоторых количествах вырабатываются, однако они не обеспечивают достойный иммунный ответ. Для диагностики ИФА на гепатит С не очень информативен, поскольку указывает на то, что вирус оставил следы, а ушел ли сам – неизвестно. При ВГС известны случаи самоизлечения, в то время как антитела против вируса остаются и продолжают циркулировать пожизненно (иммунологическая память). ПЦР заметно опережает образование антител и может выявить вирусную частицу уже через 1-1,5 недели, в то время как АТ могут появиться в интервале от 2 месяцев до полугода

ПЦР-диагностика в случае подозрения на разгул вируса гепатита С в организме человека является наиболее оптимальным методом исследования, ибо только она способна распознать присутствие «ласкового врага» в крови или биоптате печени пациента.

Однако иной раз имеют место случаи, когда АТ положительны, а результат ПЦР – отрицательный. Такое иногда происходит при очень низком количестве вируса или при его «дремлющем» состоянии в печени без выхода в кровяное русло. Чтобы все-таки найти истину, у пациента берут повторный анализ, а то и не один.

Папилломовирусная инфекция

Если не произойдет самоизлечение, тоже может, ничем себя не проявляя, долго персистировать в организме хозяина, который об этом даже не подозревает, поскольку ПЦР сделать не доводилось, а симптомы болезни отсутствовали. Однако наличие папилломовирусной инфекции, пусть и латентной, далеко не безразлично для здоровья человека, где особую опасность несут определенные типы вируса, вызывающие онкологические заболевания (типы 16, 18).

Чаще от ВПЧ страдает женская половина населения, так как вирус больше любит женскую половую сферу, а особенно – шейку матки, где некоторые типы вирусов способствуют развитию диспластических процессов, а затем и рака шейки матки, если не лечить дисплазию и дать волю вирусу. Так вот, полимеразная цепная реакция обнаружит вирусную ДНК, а затем укажет «плохой» или «хороший» (онкогенный или неонкогенный) тип поселился в организме женщины.

Другие ИППП и TORCH-инфекции

Очевидно, что полимеразная цепная реакция может найти любую чужеродную структуру, состоящую из нуклеиновых кислот, поэтому данный тест подходит для выявления всех ЗППП и TORCH-инфекций, тем не менее, он далеко не всегда используется. Зачем, скажем, проводить такие дорогие исследования для обнаружения или гонококка, если есть более доступные и дешевые?

TORCH-инфекции и ИППП настолько взаимосвязаны, что, порой, трудно определить, к какой группе следует отнести тот или иной возбудитель. В них вообще бывает сложно разобраться, так как это довольно разнообразные группы микроорганизмов, которые могут передаваться половым путем всегда или только при определенных условиях (иммунодефицит), а могут представлять интерес лишь при беременности, ввиду возможного негативного влияния на ее течение и на плод.

ПЦР – главный метод обнаружения скрытых инфекций

В основе развития клинических проявлений лежат разные возбудители, найти которые бывает под силу только ПЦР, что и является ее основной задачей иногда совместно с ИФА, а иногда в качестве единственного подтверждающего теста, особенно, если симптоматика заболевания отсутствует. Такую непростую ситуацию может создавать полимикробная инфекция, которая, помимо явных возбудителей, включает еще и условно-патогенные.

Уреаплазма зачастую рассматривается в паре с микоплазмой. И это неспроста. Данные виды, как и хламидию, не относят ни к вирусам, ни к бактериям, они проживают внутри клеток и относятся к ИППП, хотя их присутствие в здоровом организме тоже далеко не редкость. Так вот, чтобы отличить здорового носителя от больного человека, нужны особые методы, где ПЦР считается наиболее надежным, поскольку, ввиду особенностей строения и поведения этих микроорганизмов, другие исследования оказываются неэффективными.

Что касается (тип 1, 2) и , который тоже относится к герпесвирусам (тип 5), то здесь тоже ситуация неоднозначная. Инфицированность населения земного шара приближается к 100%, поэтому в данном случае очень важна идентификация вируса и его доза, что особенно играет роль при беременности, ведь взрослому человеку, вирус, прижившийся в его организме, часто не доставляет никаких хлопот и признаков заболевания не дает.

Поэтому не следует игнорировать назначенное врачом подобное обследование, ведь в некоторых случаях полимеразная цепная реакция является обязательным и необходимым методом лабораторной диагностики, способным защитить от серьезных осложнений не только женщину, но и маленького, еще не родившегося, человечка.

В заключение хочется отметить, что такой замечательный метод, как ПЦР, вот уже более 30 лет служит человечеству. При этом, задачи теста не ограничиваются поиском возбудителей инфекционных заболеваний. Полимеразная цепная реакция, рожденная на почве молекулярной биологии, неразрывно связана с генетикой, она успешно применяется в криминалистике для идентификации личности , в судебной медицине для установления отцовства, в ветеринарии, если клиника для животных имеет возможности приобретать дорогое оборудование, а также в других сферах (промышленность, сельское хозяйство и пр.).